ỨNG DỤNG KHÁNG NGUYÊN TES-30 TÁI TỔ HỢP XÁC ĐỊNH KHÁNG THỂ IgG TRONG HUYẾT THANH BỆNH NHÂN NHIỄM TOXOCARA BẰNG KỸ THUẬT ELISA
Nội dung chính của bài viết
Tóm tắt
Mục tiêu: Sử dụng kháng nguyên TES (Toxocara Excretory-Secretory) tái tổ hợp làm nguyên liệu tạo bộ sinh phẩm ELISA phát hiện kháng thể IgG kháng ấu trùng giun đũa chó/mèo để khắc phục nhược điểm về độ nhạy và độ đặc hiệu thấp khi sử dụng kháng nguyên thô TES. Phương pháp nghiên cứu: Nghiên cứu mô tả bằng thực nghiệm trong phòng thí nghiệm, sử dụng kháng nguyên TES-30 tái tổ hợp biểu hiện trong vi khuẩn E. coli BL21 (DE3) chế tạo bộ sinh phẩm ELISA để phát hiện kháng thể IgG kháng ấu trùng giun đũa chó/mèo lưu hành trong máu người. Kết quả: Chế tạo thành công bộ sinh phẩm ELISA sử dụng kháng nguyên tái tổ phát hiện các kháng thể IgG kháng Toxocara spp… Nồng độ TES-30 tối ưu sử dụng trong phản ứng ELISA là 1 µg/mL, giá trị OD cut-off xác định kết quả dương tính là 0,4 giúp chẩn đoán nhiễm Toxocara spp. với độ nhạy 93,3% và độ đặc hiệu đạt 100%. Kết luận: Phát triển thành công bộ sinh phẩm ELISA sử dụng TES-30 tái tổ hợp phát hiện kháng thể IgG kháng ấu trùng giun đũa chó/mèo.
Chi tiết bài viết
Từ khóa
Kháng nguyên tiết Toxocara, Protein tái tổ hợp TES-30, Biểu hiện
Tài liệu tham khảo
2. Trần Thị Kim Dung, Trần Phủ Mạnh Siêu. Bệnh do giun lươn và giun đũa chó mèo. Nhà xuất bản Y học. 2009: 82-107.
3. Fillaux J, Magnaval JF. Laboratory diagnosis of human toxocariasis. Vet. Parasitol. 2013; 193:327-336.
4. Moreira GMSG, Telmo P de L, Mendonça M, Moreira Ângela Nunes, McBride AJA, Scaini CJ, et al. Human toxocariasis: Current advances in diagnostics, treatment, and interventions. Trends Parasitol. 2014; 30(9):456-464.
5. Yamasaki H, et al. Molecular characterization of a cDNA encoding an excretory-secretory antigen from Toxocara canis second stage larvae and its application to the immunodiagnosis of human toxocariasis. Parasitol. Int. 1998; 47:171-181.
6. Yamasaki H, et al. Development of a highly specific recombinant Toxocara canis second-stage larva excretory-secretory antigen for immunodiagnosis of human toxocariasis. J. Clin. Microbiol. 2000; 38:1409-1413.
7. Norhaida A, et al. rTES-30USM: Cloning via assembly PCR, expression, and evaluation of usefulness in the detection of toxocariasis. Ann. Trop. Med. Parasitol. 2008; 102:151-160.