ỨNG DỤNG KHÁNG NGUYÊN TES-30 TÁI TỔ HỢP XÁC ĐỊNH KHÁNG THỂ IgG TRONG HUYẾT THANH BỆNH NHÂN NHIỄM TOXOCARA BẰNG KỸ THUẬT ELISA

Nguyễn Thị Hà Trinh1, Nguyễn Minh Quyền2, Hoàng Thị Ngọc Diệp2, Hoàng Thị Hòa3, Đỗ Như Bình2, Nguyễn Khắc Lực2, Lê Quốc Tuấn2,
1 Đại học Y Dược Buôn Ma Thuột
2 Học viện Quân y
3 Đại học Điều dưỡng Nam Định

Nội dung chính của bài viết

Tóm tắt

Mục tiêu: Sử dụng kháng nguyên TES (Toxocara Excretory-Secretory) tái tổ hợp làm nguyên liệu tạo bộ sinh phẩm ELISA phát hiện kháng thể IgG kháng ấu trùng giun đũa chó/mèo để khắc phục nhược điểm về độ nhạy và độ đặc hiệu thấp khi sử dụng kháng nguyên thô TES. Phương pháp nghiên cứu: Nghiên cứu mô tả bằng thực nghiệm trong phòng thí nghiệm, sử dụng kháng nguyên TES-30 tái tổ hợp biểu hiện trong vi khuẩn E. coli BL21 (DE3) chế tạo bộ sinh phẩm ELISA để phát hiện kháng thể IgG kháng ấu trùng giun đũa chó/mèo lưu hành trong máu người. Kết quả: Chế tạo thành công bộ sinh phẩm ELISA sử dụng kháng nguyên tái tổ phát hiện các kháng thể IgG kháng Toxocara spp… Nồng độ TES-30 tối ưu sử dụng trong phản ứng ELISA là 1 µg/mL, giá trị OD cut-off xác định kết quả dương tính là 0,4 giúp chẩn đoán nhiễm Toxocara spp. với độ nhạy 93,3% và độ đặc hiệu đạt 100%. Kết luận: Phát triển thành công bộ sinh phẩm ELISA sử dụng TES-30 tái tổ hợp phát hiện kháng thể IgG kháng ấu trùng giun đũa chó/mèo.

Chi tiết bài viết

Tài liệu tham khảo

1. Smith H, Holland C, Taylor M, Magnaval JF, Schantz P, Maizels R. How common is human toxocariasis? Towards standardizing our knowledge. Trends in Parasitology. 2009; 25(4): 182-188.
2. Trần Thị Kim Dung, Trần Phủ Mạnh Siêu. Bệnh do giun lươn và giun đũa chó mèo. Nhà xuất bản Y học. 2009: 82-107.
3. Fillaux J, Magnaval JF. Laboratory diagnosis of human toxocariasis. Vet. Parasitol. 2013; 193:327-336.
4. Moreira GMSG, Telmo P de L, Mendonça M, Moreira Ângela Nunes, McBride AJA, Scaini CJ, et al. Human toxocariasis: Current advances in diagnostics, treatment, and interventions. Trends Parasitol. 2014; 30(9):456-464.
5. Yamasaki H, et al. Molecular characterization of a cDNA encoding an excretory-secretory antigen from Toxocara canis second stage larvae and its application to the immunodiagnosis of human toxocariasis. Parasitol. Int. 1998; 47:171-181.
6. Yamasaki H, et al. Development of a highly specific recombinant Toxocara canis second-stage larva excretory-secretory antigen for immunodiagnosis of human toxocariasis. J. Clin. Microbiol. 2000; 38:1409-1413.
7. Norhaida A, et al. rTES-30USM: Cloning via assembly PCR, expression, and evaluation of usefulness in the detection of toxocariasis. Ann. Trop. Med. Parasitol. 2008; 102:151-160.