TẠO DÒNG VÀ BIỂU HIỆN GEN MÃ HÓA KHÁNG NGUYÊN TÁI TỔ HỢP NS1 CHUNG BỐN CHỦNG VI RÚT DENGUE TRONG VI KHUẨN ESCHERICHIA COLI
Nội dung chính của bài viết
Tóm tắt
Mục tiêu: Tách dòng, biểu hiện và tinh sạch kháng nguyên tái tổ hợp NS1 chung có các điểm epitope nhận biết được kháng thể kháng bốn chủng vi rút Dengue (DENV). Phương pháp nghiên cứu: Đoạn gen mã hóa cho kháng nguyên NS1 chung bốn chủng được gắn chèn vào vector pET22b+ sau đó được biến nạp vào chủng tế bào E.coli BL21. Sản phẩm tái tổ hợp được kiểm tra bằng các phương pháp PCR, enzyme cắt giới hạn, giải trình tự và SDS-PAGE. Kết quả: Đoạn gen mã hóa kháng nguyên tái tổ hợp NS1 có kích thước 417 bp, mã hóa tạo chuỗi polypeptide dài 139 amino acid, và tương đồng 100% với trình tự chuỗi polypeptide của kháng nguyên NS1 chung cho bốn chủng DENV đã được công bố trên GenBank. Kết quả điện di trên SDS-PAGE cho thấy protein tái tổ hợp 6xHis-rNS1 có khối lượng phân tử khoảng 18 kDa. Kết luận: Biểu hiện thành công kháng nguyên tái tổ hợp NS1 chung bốn chủng DENV trong tế bào E.coli. Đây là kết quả nghiên cứu bước đầu định hướng tạo kháng thể đơn dòng chẩn đoán phát hiện bốn chủng DENV tại Việt Nam.
Chi tiết bài viết
Từ khóa
Vi rút Dengue, E.coli, NS1, Kháng nguyên tái tổ hợp
Tài liệu tham khảo
2. Muller, D. A., & Young, P. R. The flavivirus NS1 protein: molecular and structural biology, immunology, role in pathogenesis and application as a diagnostic biomarker. Antiviral Research. 2013; 98(2): 192-208. https://doi.org/10.1016/J.ANTIVIRAL.2013.03.008.
3. Tuiskunen Back, A., & Ake, L. Dengue viruses-an overview. 2013. https://doi.org/10.3402/iee.v3i0.19839.
4. Reyes-Sandoval, A., & Ludert, J. E. The Dual Role of the Antibody Response Against the Flavivirus Non-structural Protein 1 (NS1) in Protection and Immuno-Pathogenesis. Frontiers in Immunology. www.Frontiersin.Org. 2019; 1:1651. https://doi.org/10.3389/ fimmu.2019.01651.
5. Fisher, R., Lustig, Y., Sklan, E. H., & Schwartz, E. The Role of NS1 Protein in the Diagnosis of Flavivirus Infections. 2023; 15(2). In Viruses. MDPI. https://doi.org/10.3390/v15020572.
6. Rastogi, M., Sharma, N., & Singh, S. K. Flavivirus NS1: A multifaceted enigmatic viral protein. 2016. https://doi.org/10.1186/s12985-016-0590-7