XÂY DỰNG QUY TRÌNH CHẾ TẠO QUE THỬ SẮC KÝ MIỄN DỊCH CẠNH TRANH PHÁT HIỆN OCHRATOXIN A TRONG CÀ PHÊ
Nội dung chính của bài viết
Tóm tắt
Mục tiêu: Xây dựng quy trình chế tạo que thử sắc ký miễn dịch (lateral flow immunochromatography assay - LFIA) cạnh tranh phát hiện Ochratoxin A (OTA) trong cà phê. Phương pháp nghiên cứu: Nghiên cứu thử nghiệm trong labo. Thực hiện theo 8 bước, với mỗi bước thực hiện nghiên cứu tối ưu các thông số để tăng độ nhạy của que thử. Hiệu quả phát hiện của que thử bao gồm giới hạn phát hiện, độ lặp lại, độ ổn định và phản ứng chéo. Kết quả: Kích thước hạt nano vàng 30nm được lựa chọn là thông số tối ưu. Nồng độ kháng thể tối ưu phủ lên hạt nano vàng là 10 µg/mL. Nồng độ OTA-BSA (bovine serum albumin) tối ưu trải trên vạch phát hiện là 1 mg/mL, tạo ra tín hiệu màu đậm và ổn định, giúp phân biệt rõ giữa mẫu dương tính và âm tính. Kết luận: Đã phát triển thành công que thử sắc ký miễn dịch cạnh tranh phát hiện OTA trong cà phê với giới hạn phát hiện (limit of detection - LOD) là 4 µg/L.
Từ khóa
Que thử sắc ký miễn dịch, Độ nhạy, Ochratoxin A
Chi tiết bài viết
Tài liệu tham khảo
2. IARC Working Group on the Evaluation of Carcinogenic Risks to Humans. Some traditional herbal medicines, some mycotoxins naphthalene and styrene. IARC Monogr Eval Carcinog Risks Hum. 2002; 82:1-556. PMCID: PMC4781602.
3. Stoev SD. Long term preliminary studies on toxic and carcinogenic effect of individual or simultaneous exposure to ochratoxin A and penicillic acid in mice. Toxicon. 2020 Sep; 184:192-201. DOI: 10.1016/j.toxicon.2020.06.013.
4. Wong RC, Harley YT. Lateral Flow Immunoassay. Humana Press. Springer Science & Business Media. 2009. DOI 10.1007/978-1-59745-240-3.
5. Claudio Parolo, Amadeo Sena-Torralba, José Francisco Bergua, et al. Tutorial: Design and fabrication of nanoparticlebased lateral-flow immunoassays. Nature Protocols. 2020 Dec; 15(12): 3788-3816. DOI: 10.1038/s41596-020-0357-x.
6. Yiqiang Chen, Qian Chen, Miaomiao Han, et al. Development and optimization of a multiplex lateral flow immunoassay for the simultaneous determination of three mycotoxins in corn, rice and peanut. Food Chemistry. 2016 Dec 15; 213:478-484. DOI: 10.1016/j.foodchem. 2016.06.116.
7. Xin Li, Peiwu Li, Qi Zhang, et al. Multi-component immunochromatographic assay for simultaneous detection of aflatoxin B1, ochratoxin A and zearalenone in agro-food. Biosensors and Bioelectronics. 2013 Nov 15; 49:426-32. DOI: 10.1016/j.bios.2013.05.039.
8. Jihea Moon, Giyoung Kim, Sangdae Lee. Development of nanogold-based lateral flow immunoassay for the detection of Ochratoxin A in buffer systems. Journal of Nanoscience and Nanotechnology. 2013 Nov; 13(11):7245-9. DOI: 10.1166/jnn.2013.8099.